Klinická studie HairActiv

ÚVOD

K možnosti průchodu látek zvnějšku do kůže či naopak (tekutina procházející kůží směrem ven) dochází ve velmi omezeném množství pouze za předpokladu zdravé kůže, a to díky přítomnosti mechanismů soudržnosti mezi keratinocyty (jež jsou více či méně stratifikovány) a ochranným hydrolipidickým filmem.

Kůže je orgánem s vlastní propustností, kterou za normálních podmínek řídí prostupování tekutin skrze póry potních žláz a vlasových folikul, které se nachází rozprostřené po celé ploše kůže. Velikost žláz a vlasových folikul se liší v závislosti na umístění dané kůže.

Proto v závislosti na tloušťce zrohovatělé vrstvy pronikají aktivní složky do různé hloubky: absorpční kapacita dlaně nebo chodidla je nízká, naopak v případě očního víčka, které má jen tenkou zrohovatělou vrstvu, je tato absorpční schopnost vysoká. Kromě toho základním kritériem pro vstřebávání látek je i velikost žláz nebo vlasových folikul: pokožka hlavy má vyšší absorpční schopnost než předloktí.

Aktivním vstřebáváním farmaceutických / estetických látek do kůže se zvyšuje její propustnost, a to pomocí zařízení generující elektrické pole, což se velmi často používá v dermatologii. Tato technika využívá účinku pulsujícího proudu, díky kterému se otevírají a zavírají kanály buněčných membrán, což následně umožňuje pronikání aktivních látek do pokožky. Díky napětí dochází k polarizaci použitých látek a do buňky tak pronikají dokonce i nepolarizované buňky.

Tento účinek se ještě zvyšuje s rostoucí elektroforézní pohyblivostí molekul a závisí na intenzitě aplikovaného proudu, který určuje elektroosmotický průchod jednotlivými vrstvami pokožky.

V dermatologii se vstřebávání aktivních látek jednotlivými vrstvami pokožky stalo léčebnou alternativou systematického podávání léků. Výhodou je lokalizovaná a cílená léčba bez vedlejších účinků, které jsou spojeny s celkovým podáváním léků.

Kožní patologie, mezi které patří akné, růžovka a trichologická onemocnění, jako telogenické vypadávání vlasů, alopecie či jiné záněty pokožky hlavy, lze tak léčit alternativním způsobem, jehož účinnost je zaručena přímým působením na léčený orgán.

CÍL STUDIE

Cílem studie je prokázat účinnost transdermálního elektroporátoru (TRICOPLUS, Blue-Moon) na průchodnost aktivních látek do hlubokých vrstev pokožky, a to pomocí fluorescentní látky. Hodnocení bude provedeno pod mikroskopem.

Konfokální mikroskopie je technikou, která umožňuje vizuální kontrolou provést téměř histologické vyšetření pacienta. Mikroskop využívá zdroje nedymového laseru, který je zaostřen na hodnocenou oblast pomocí složité soustavy zrcadel. Jednotlivé typy buněk a dermální struktura, keratinocyty, melanocyty, fibroblasty, kapiláry a červené krvinky, které do kůže pronikly zevnitř, lymfocyty, buňky zánětu a vlákna kolagenu odráží světlo odlišným způsobem, díky čemuž je lze přesně zvýraznit, jak ukazuje skutečné histologické vyšetření.

Díky této neinvazivní technice lze snadno vystopovat jakoukoli fluorescentní látku a přesně stanovit její polohu, dokud je odraz viditelný.

Díky rozlišení mikroskopu (Vivascope 1500-Lucid, USA) použitého v rámci této studie bylo možno sledovat fluorescentní látky až do hloubky 2,5 mm, což odpovídá střední / hluboké vrstvě pokožky.

MATERIÁLY A TECHNIKA

Cílem zkoušky je zhodnocení a kvantifikace penetrační kapacity zařízení dodávaného společností Blue-Moon skrze pokožku hlavy. Jako dobře známá látka byla zvolen pyrithion zinku 48% (ve vodním roztoku). Test byl proveden na 10 osobách obou pohlaví. Jednalo se o dobrovolníky v dobrém zdravotním stavu, kteří s testováním souhlasili. Dobrovolníci trpěli trichologickou patologií (např. telogenickým vypadáváním vlasů či alopecií).

Mikroskopická zkouška (s cílem vysledovat cestu pyrithionu zinku) byla provedena u všech dobrovolníků v době T0 před a T1 po léčbě specificky definované oblasti. Komise společnosti Blue-Moon rozhodla, že na každého dobrovolníka připadá 20 minut na jednotlivý léčebný zásah. U třech jedinců bylo provedeno hodnocení vysílaného výkonu (85% , 50% a 60% celkového výkonu zařízení dle požadavků komise Blue-Moon).

Pouze u jedné osoby bylo provedeno hodnocení stupně dermální absorpce testované látky prostřednictvím okluzivní medikace na levém předloktí a elektroporace TRICOPLUS na pravém předloktí. Cílem bylo získání srovnávacího vzorku dermální penetrace aktivní látky bez a s použitím elektroporace TRICOPLUS.

VÝSLEDKY

V případě zdravé kůže byla vyšší míra penetrace zaznamenána u infundibula mazové jednotky ekrinních žláz. Podle literatury je proces absorpce látek pokožkou zcela jistě méně aktivní.

Hodnocení pod mikroskopem absorpce zkoumaného roztoku na levém předloktí (okluzivní medikace po dobu 3 hodin) ukazuje na omezenou penetraci látky do pokožky (< 1 mm), která prošla pouze skrz infundibulum .

Mikroskopické hodnocení absorpce stejného zkoumaného vzorku na pravém předloktí, které bylo ošetřeno TRICOPLUS, ukazuje hlubší absoprci (> 2 mm) nejen skrze infundibulum, ale částečně i skrze kanál buněčné membrány, dokonce i v případě omezení na epidermální oblast (1 mm).

Tato data potvrzují zvýšenou schopnost penetrace aktivní látky s využitím TRICOPLUS.

Absorpce látek skrz pokožku hlavy probíhá zejména skrz infundibulum, mazové a potní žlázy, což umožňuje pronikání do větší hloubky i v případě vyšší molekulární hmotnosti.

Tento princip využívá trikologická terapie.

V naší studii bylo prokázáno, že transdermální penetrace (elektroporace) vykazuje vyšší míru pronikání také skrze kanál buněčných membrán, což se projevilo i zvýrazněním odrazu krystalek pyrithionu zinku až do hloubky 2,4 mm (střední / hluboká vrstva pokožky).

ZÁVĚR

Technika mikroskopie patří mezi standardní a cenné metody hodnocení kůže (které se blíží histologii). Vyšetření pomocí konfokálního mikroskopu umožňuje zkoumání vrstvu pokožky (a to s rozlišením na jednotlivé buňky), jenže je založena na odlišné odrazivosti jednotlivých cílů pomocí paprsků laseru (Nd-Yag). V souladu s tímto principem jsme provedli test průchodu známého aktivního přípravků kůží (pyrithion zinku), který dobře odráží světlo.

Zařízení TRICOPLUS (Blue-Moon) prokázalo schopnost pronikání do ionizovatelné pokožky, dokud nedosáhne svých cílů v podobě léčebného nebo kosmetického účinku, což jasně ukazují mikroskopické snímky pořízené během studie.

Ze získaných snímků (např. snímek kapilicia) je také patrné, jakým způsobem proniká aktivní látka zejména skrz infundibulum a kanálky žláz a sekundárně mezibuněčným a nitrobuněčným způsobem. Na druhou stranu v literatuře je dobře známo, že téměř všechny aktivní složky mají tendenci pronikat do pokožky skrz infundibulum.

Díky snímkům z provedeného hodnocení se prokázalo, že krystalky pyrithionu zinku lze najít všude od prvního mikronu pokožky až do hloubky 3,3 mm. Neexistují žádné důkazy, že by jiná aktivní látka dokázala tuto hranici překročit.

Studie přinesla materiály a fotografie, které jsou nedílnou součástí závěrečného zhodnocení provedené klinické zkoušky. Komise Blue-Moon je oprávněna tuto studii nebo její část použít výhradně se svolením osob, které prováděli daný experiment.